抗原免疫注意事項
1.純度問題
作為抗原,其純度越高,抗體的下游制備過程就越簡單:對于多抗體,高免血清抗體分子越多,越容易獲得低背景的抗體;對于單抗體制備,更容易篩選特異性抗體分泌細胞株。
2.抗原毒性問題
作為一種抗原物質,對動物體的毒性越小,毒性越大,動物容易死亡或狀態不佳,難以產生高質量的抗體。為了制備蛇毒蛋白的單抗,研究人員使用體外細胞免疫法:脾臟B體外培養淋巴細胞。
3.抗原溶劑問題
抗原溶劑一般選用PBS它對生理鹽水很友好,但在抗原制備和凈化過程中不可避免地會引入一些去污劑【Triton,SDS或SKL(十二烷基肌氨酸鈉)等Tris等等)。免疫前不去除這些物質,動物免疫后會死亡,免疫力會嚴重下降。低濃度尿素可溶于不溶性蛋白質(如包含體),因為動物能承受低濃度尿素。